Saren e o Soberano foram derrotados e a Citadela foi salva. Dependendo das escolhas do jogador feitas no primeiro Efeito de Massa, a humanidade pode ser tudo o que resta do Conselho da Cidadela. Claro que isso não os impede de ignorar o antigo herói de guerra Shepard, que sabe que a ameaça dos Reapers ainda é real. Em vez disso, enviam-no numa missão aborrecida para encontrar algum Geth no sistema Terminus. O inevitável acontece: um novo inimigo entra em cena, destrói a nave de Shepard, a Normandia e mata o herói da galáxia. Fim do jogo?
Não, nem por isso. Cerberus, uma conhecida rede de direita, acredita que a ameaça dos Reapers é real e vê apenas uma hipótese de salvar a raça humana: Shepard. Assim, investem milhões e milhões de créditos no projecto Lazarus, e dois anos após a morte de Shepard a flutuar no espaço, ele (ela) volta a acordar a bordo da Estação Cerberus. A principal missão dada por Cerberus: descobrir mais sobre a misteriosa raça dos Colectores que raptam milhões de colonos humanos com um propósito desconhecido, e descobrir a sua possível ligação com os Reapers.
Mass Effect 2 é um híbrido de jogo de role-playing e de atirador de terceira pessoa. Após o prólogo, onde o jogador testemunha a destruição da Normandia original, tem de criar uma nova personagem e escolher entre uma das seis classes, cada uma com os seus próprios poderes. A decisão também influencia quais as armas que o jogador pode utilizar durante o jogo, uma vez que só o soldado pode empunhar todas as armas do jogo. Durante o decorrer do jogo, o jogador e os seus companheiros de equipa ganham pontos de experiência matando inimigos, cumprindo missões e arrombando cofres de modo a subir de nível. Para cada nível acima entre 1-20, são atribuídos dois pontos de talento, de 21 ao nível máximo de 30 apenas um, com o qual os poderes do personagem podem ser aumentados em quatro fases. Uma vez adquirido o último upgrade, tem de ser escolhida uma especialização, tornando o talento ainda mais poderoso num aspecto. Tudo isto vale também para os companheiros de equipa de jogadores. O jogador começa com dois companheiros ao seu lado, mas pode recolher até dez durante o decorrer do jogo. Embora só lhe seja permitido trazer dois com ele para uma missão, os pontos de experiência recolhidos serão igualmente partilhados com os que forem deixados para trás.
A luta é feita de uma forma semelhante à de Gears of War, com os personagens a serem capazes de se esconderem e de olharem para fora para darem alguns tiros. Além disso, a saúde e a energia do escudo são regeneradas automaticamente se o protagonista ou os seus companheiros de equipa evitarem ser atingidos durante alguns segundos. Para combater os vários tipos de inimigos, cada classe tem acesso a diferentes tipos de armas como a espingarda de atirador furtivo e a pistola pesada para o infiltrado, bem como a cinco tipos diferentes de armas pesadas. As armas requerem agora munições que ou são largadas por inimigos mortos ou espalhadas pelo nível, mas existem apenas dois tipos: uma para as armas pesadas e outra para todas as outras. Armas pesadas como o lança-granadas vêm com um fornecimento muito limitado de munições, mas são muito poderosas mesmo contra mechs a pleno vapor.
A gestão do inventário foi inteiramente removida. O jogador só é capaz de alterar o carregamento de armas da sua equipa a partir do pequeno conjunto que irá recolher durante o decorrer do jogo. Os seus companheiros de equipa já não têm armaduras diferentes, apenas a aparência do protagonista pode ser alterada através da pesquisa de novas peças de armadura e juntá-las a um fato completo na sua cabine a bordo da Normandia. Através da pesquisa, o jogador também tem acesso a actualizações à Normandia, aos seus companheiros de equipa e às suas ferramentas. Para fazer pesquisa, o jogador não só precisa de encontrar ou comprar os planos para a actualização, mas também precisa de minerais suficientes. Os quatro tipos de minerais do jogo ou são encontrados em arcas durante uma missão ou recolhidos através de um minijogo de exploração no mapa da galáxia. No minijogo, o jogador usa um cursor para se mover à volta da face do planeta e enviar sondas se encontrar uma fonte mineral. As buscas laterais também podem ser encontradas desta forma e são mostradas como anomalias num planeta.
Para além do combate, a segunda parte mais importante do jogo são os diálogos de escolha múltipla. As decisões que o jogador toma aqui influenciam fortemente o seu percurso, decidindo se se tornará uma pessoa má ou boa. Para o efeito, não só as escolhas de diálogo são ordenadas por boas, neutras e más, mas existem opções de diálogo especiais para cada caminho, se o jogador tiver pontos suficientes que possam terminar um diálogo prematuramente a favor dos heróis. Eventos de tempo rápido foram introduzidos, onde o jogador pode realizar uma acção de alinhamento independente do seu caminho actual, tal como bater na cara de um repórter desagradável para a calar.
Ao contrário do primeiro jogo, as versões para PC e Xbox-360 são quase idênticas. A única diferença é a interface que, na Xbox 360, apresenta um menu radial com a capacidade de colocar quatro potências em hot-keys, em oposição à versão PC, que apresenta uma interface arrastar e largar controlada pelo rato e uma fita de ranhura rápida para até oito potências a serem activadas através da utilização das teclas numéricas. Em ambas as plataformas, o jogador pode utilizar directamente as potências que os seus companheiros de equipa possuem.
Uma das características mais importantes do Efeito Massa 2 é a capacidade de importar uma personagem do primeiro jogo. Embora a própria personagem, incluindo classe e aparência, ainda possa ser alterada no início do jogo, ele receberá um enorme bónus tanto em créditos, pontos de experiência e minerais no início do jogo, dependendo do nível da personagem que tinha no final. Além disso, centenas de decisões tomadas pelo jogador no primeiro jogo terão um impacto em partes mais ou menos importantes do Efeito de Massa 2. Isto inclui o estado do universo no início do jogo, que romances o jogador perseguiu e quais dos seus companheiros de equipa morreram ou sobreviveram ao fim, bem como decisões menores como a sobrevivência da rainha Rachni. Se Shepard sobreviver ao fim do Efeito de Massa 2, o jogador poderá transportá-lo para o Efeito de Massa 3, também.
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