Situado num futuro não muito distante, o Japão cria a Força de Auto-Defesa da Informação (I-SDF). A criação desta força é vista como uma violação do direito internacional e da constituição do Japão, e provoca o aumento de tensões entre o Japão, a China e a Coreia do Norte. Com o tempo, a Coreia do Norte e a China estabeleceram bloqueios marítimos em torno do Japão, e o Japão pede ajuda aos Estados Unidos, citando o artigo nove da Constituição do pós-guerra. Ao longo deste tempo, o Japão revela cada vez mais informação de que o infame Dia do Ouro Negro foi causado por ataques de guerra de informação intencionais. Enquanto os Estados Unidos se preparam para lançar o USS Clarence E. Walsh, o Terceiro Echelon envia o famoso Sam Fisher numa missão que parece não estar relacionada com o incidente, mas que pode acabar por ser o elemento mais importante de tudo isto.
Em Splinter Cell: Chaos Theory, os jogadores assumem o papel de Sam Fisher operacional de campo para uma terceira excursão. Fisher tem alguns novos movimentos desta vez, e tem também uma nova arma sempre à sua disposição; uma faca de combate. Utilizando a faca, Sam pode ou matar os seus inimigos, ou simplesmente derrubá-los. No final de cada missão, é dada ao jogador uma visão geral de como eles o fizeram. Quanto mais pessoas o jogador poupar, melhor será a pontuação de sucesso.
O jogo de um jogador é mais aberto do que os dois últimos jogos da Splinter Cell. Enquanto os jogadores ainda são forçados a atravessar algumas áreas num “túnel” como a moda, sem escolha de para onde ir, há muitas instâncias onde podem decidir como gostariam de lá chegar. Por exemplo, nas cavernas, pode-se ou matar dois inimigos e atravessar a ponte, ou deixá-los em paz, esgueirar-se pelo caminho lateral, e subir uma escada no final, contornando a luta por completo, mas ainda assim terminando no mesmo local.
Ao longo do jogo são visitados muitos locais diferentes, tais como um farol, uma casa de chá japonesa, Seul, Nova Iorque durante um apagão na Costa Leste, e outros locais tão exóticos.
O modo multijogador Spies-vs-Mercs que apareceu no jogo anterior regressou, com algumas novas características. Há vários mapas novos e grandes para jogar, assim como versões actualizadas do jogo anterior.
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